產(chǎn)品描述

2 x Taq PCR Master Mix 是PCR 反應(yīng)預(yù)混液，其中包含Taq DNA Polymerase、dNTPs、反應(yīng)緩沖液、loading Dye 等成分，使用時(shí)只需取適量本產(chǎn)品，加入模板和引物，并加入 ddH2O 補(bǔ)足體積，使反應(yīng)體系濃度為 1× 即可進(jìn)行 PCR 反應(yīng)。本產(chǎn)品最長(zhǎng)可擴(kuò)增 5kb DNA片段，具有良好的擴(kuò)增特異性和模板兼容性， PCR 產(chǎn)物 3' 端帶突出 A 堿基，純化后可直接用于 T/A 克隆。

本產(chǎn)品中包含兩種染料，PCR反應(yīng)完成后無(wú)需額外添加 loading buffer，可以直接進(jìn)行電泳，且電泳過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)兩個(gè)指示條帶。該染料不影響 PCR 擴(kuò)增效率，但對(duì)于需要對(duì) PCR 產(chǎn)物進(jìn)行吸光度、熒光等光學(xué)分析的實(shí)驗(yàn)，建議在分析前對(duì) PCR 產(chǎn)物進(jìn)行純化，或使用無(wú)染料的PCR預(yù)混液。

訂購(gòu)信息

運(yùn)輸與保存

藍(lán)冰運(yùn)輸。-20℃保存，有效期24個(gè)月。

使用方法

1.    常規(guī) PCR 反應(yīng)體系

(1) 引物推薦終濃度為 0.2~0.4 μM，效果不佳時(shí)可以在 0.1~1 μM 濃度范圍內(nèi)進(jìn)行調(diào)整； 

(2)  不同模板最佳反應(yīng)濃度有所不同，以 50 μL 體系為例：模板為基因組 DNA 時(shí)，一般推薦的使用量為 10~400 ng；當(dāng)模板為質(zhì)粒或病毒 DNA 時(shí)，一般推薦的使用量為 10 pg~20 ng。

2.    常規(guī) PCR 反應(yīng)程序

(1)  該預(yù)變性條件適合絕大多數(shù)擴(kuò)增反應(yīng)， 對(duì)于一些復(fù)雜模板， 例如：菌液、菌落（尤 其是酵母）的PCR 擴(kuò)增，預(yù)變性時(shí)間可適當(dāng)延長(zhǎng)至 10 min，以提高預(yù)變性效果；

(2)  關(guān)于延伸速率，當(dāng)目的片段長(zhǎng)度不超過(guò) 2 kb 時(shí)，推薦使用 30 sec/ kb；當(dāng)目的片段長(zhǎng)度大于 2 kb 時(shí)，推薦使用 60 sec/kb。延伸速率與模板復(fù)雜程度有關(guān)，如遇產(chǎn)率較低可適當(dāng)提高延伸時(shí)間。

注：如果使用酵母菌液作為PCR 擴(kuò)增模板，建議目的片段長(zhǎng)度不超過(guò)2.5kb， 若超出2.5kb, 建議將酵母菌液預(yù)先進(jìn)行破壁處理。

3.    凝膠濃度對(duì)應(yīng)的染料遷移距離

注：染料會(huì)影響吸光度。

注意事項(xiàng)

1.     本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。

2.     本產(chǎn)品在短期 -20℃ 儲(chǔ)存時(shí)不會(huì)凝固，可以隨取隨用，如遇儲(chǔ)存溫度波動(dòng)，體系結(jié)冰為正?，F(xiàn)象不影響使用。

3.     建議將所有的反應(yīng)組分在冰上配制，最后加入2 x Taq PCR Master Mix。

4.     使用基因組模板進(jìn)行較長(zhǎng)片段擴(kuò)增需要使用高質(zhì)量純化的DNA模板，可以提高 PCR 成功率。

5.     本產(chǎn)品擴(kuò)增產(chǎn)物可用于 T/A 克隆。由于本產(chǎn)品含有 Loading Dye，PCR 產(chǎn)物需經(jīng)過(guò)切膠回收后才可充分去除 Loading Dye。

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本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。