線(xiàn)粒體染色試劑盒用于沉淀真菌/酵母細(xì)胞 培養(yǎng)箱：用于染色孵育 （共聚焦）熒光顯微鏡：用于細(xì)胞熒光分析 1 實(shí)驗(yàn)步驟 實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，將－20 ℃冰箱里的試劑盒中的染色液（Reagent D）置入冰槽里融化，然后分別移 出xx 微升預(yù)備液（Reagent C ）和 xx 微升染色液（Reagent D ）到新的 1.5 毫升離 心管，標(biāo)記為染色工作液，并放在暗室里備用。然后進(jìn)行下列操作。 一、 活體染色 7 1． 準(zhǔn)備好 1 毫升新鮮的酵母菌液（OD600 ＝1 至 2 ；1 X 10 細(xì)胞/毫升） 2 ． 移入到 1.5 毫升離心管 3 ． 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心 10 分鐘，速度為 1000g （或3000RPM，例如 eppendorf 5415 ） 4 ． 小心抽掉上清液 5 ． 加入 xx 毫升預(yù)冷的 清理液（Reagent A ），混勻 6 ． 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心 10 分鐘，速度為 1000g （或3000RPM，例如 eppendorf 5415 ） 7 ． 小心抽掉上清液 8． 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟 5 至 7 一次 9 ． 加入 xx 升預(yù)冷的 清理液（Reagent A ），混勻 10．加入xx 微升含有 預(yù)備液（Reagent C ）和染色液（Reagent D ）的染 色工作液，充分混勻

 

  線(xiàn)粒體染色試劑盒是設(shè)計(jì)用來(lái)標(biāo)記活細(xì)胞的線(xiàn)粒體的，使之帶綠色熒光。本試劑盒使用一種專(zhuān)屬染料，選擇性地在不同膜電位的線(xiàn)粒體中積累。這種線(xiàn)粒體指示劑是一種疏水性復(fù)合物，可以輕易地滲透進(jìn)入活細(xì)胞中，且當(dāng)進(jìn)入細(xì)胞后就被鎖定在線(xiàn)粒體中。這種熒光性線(xiàn)粒體指示劑可以在線(xiàn)粒體中保留很長(zhǎng)時(shí)間，因?yàn)樵撝甘緞в心芏ㄎ挥诩?xì)胞的基團(tuán)。其關(guān)鍵特征是其染色效率顯著性提高。本標(biāo)記方法十分穩(wěn)定，需要親手操作的地方很少。它可以用于許多熒光研究中，例如微孔板分析，免疫組化和流式細(xì)胞術(shù)。它也可以用于多種不同類(lèi)型的研究中，包括細(xì)胞粘附性、趨化性、多藥物抗性、細(xì)胞活性、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞毒性的研究。本試劑盒提供所有的必需組分和*細(xì)胞標(biāo)記方法。它適用于增殖型和非增殖型細(xì)胞，也可以用于懸浮和貼壁細(xì)胞。