李記生物細(xì)胞增殖系列上新啦!為滿足不同客戶的需求,特推出EdU系列。文末開學(xué)季CCK-8大促!*+加贈好禮!點(diǎn)擊即有機(jī)會得600元海底撈劵(0門檻)!
下文是細(xì)胞增殖及細(xì)胞活力檢測方法介紹,快來看看吧!
新品簡介
李記生物EdU檢測試劑盒,可以高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。
不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點(diǎn),操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性。
產(chǎn)品優(yōu)勢
準(zhǔn)確:與BrdU方法相比,EdU檢測不需要DNA變性,不需要抗原修復(fù),不需要抗原抗體反應(yīng)。
靈敏:EdU細(xì)胞增殖檢測可以直接并準(zhǔn)確地檢測出新DNA的合成。
便捷:能夠與各種抗體或熒光蛋白同時標(biāo)記,以檢測細(xì)胞其他性狀特征。
案例圖示
檢測方法
1.DNA合成檢測——BrdU / EdU檢測法
細(xì)胞在增殖過程中,DNA的倍增,是顯著的變化之一,通過檢測DNA量的變化,可判斷細(xì)胞數(shù)量的變化。
EdU檢測法是BrdU的替代方法,也是目前更廣泛適用的方法,RrdU需抗體在破開DNA雙聯(lián)后與抗原分子集合后才能顯示,這個處理過程對細(xì)胞有損傷,而EdU同樣可以代替胸腺嘧啶(T)滲入DNA,但其分子大小只有BrdU的1/500,可以直接在DNA雙鏈形態(tài)下與染料分子結(jié)合用于檢測,無需抗體結(jié)合反應(yīng),實(shí)驗(yàn)過程簡單,對細(xì)胞損傷小,是新一代基于DNA檢測時報增殖的試劑。
2.代謝活性物質(zhì)檢測——MTT、CCK8
CCK8中的主要物質(zhì)WST-8是一種類似于MTT(對細(xì)胞有損傷)的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內(nèi)的琥珀酸脫氫酶還原生成橙黃色的、水溶性formazan。細(xì)胞增殖越多越快,則顏色越深;反之,則顏色越淺。CCK-8對細(xì)胞基本無毒性,可進(jìn)行活細(xì)胞動態(tài)測定,試劑穩(wěn)定即開即用,重復(fù)性好于MTT。
3.羥基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺脂(CFSE)檢測法
羥基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺脂(CFSE)是一種可穿透細(xì)胞膜的熒光染料, CFSE進(jìn)入細(xì)胞后可以不可逆地與細(xì)胞內(nèi)的氨基結(jié)合偶聯(lián)到細(xì)胞蛋白質(zhì)上。當(dāng)細(xì)胞分裂時,CFSE標(biāo)記熒光可平均分配至兩個子代細(xì)胞中,子代細(xì)胞熒光強(qiáng)度是親代細(xì)胞的一半,在一個增殖的細(xì)胞群中,各連續(xù)代細(xì)胞的熒光強(qiáng)度遞減,利用流式細(xì)胞儀在488nm激發(fā)光和熒光檢測通道可對其進(jìn)行分析。
4.ATP濃度檢測
細(xì)胞內(nèi)的ATP是細(xì)胞能量的重要來源,其含量與細(xì)胞周期和細(xì)胞狀態(tài)關(guān)系密切,死細(xì)胞或?yàn)l臨死亡的細(xì)胞幾乎不含ATP。利用熒光素酶Luciferase及其底物熒光素Luciferin的ATP檢測以生物發(fā)光為基礎(chǔ),能夠?yàn)槟峁┓浅l`敏的結(jié)果,這種方法非常適用于高通量細(xì)胞增殖檢測和篩選。
5.細(xì)胞增殖相關(guān)抗原檢測
Ki-67,PCNA都是細(xì)胞增殖因子,在細(xì)胞異常增殖中均有顯著的表達(dá)差異,是研究腫瘤細(xì)胞增殖的重要核抗原。Ki-67,PCNA均與細(xì)胞周期密切相關(guān),通過免疫反應(yīng)檢測Ki-67,PCNA可反應(yīng)腫瘤細(xì)胞增殖情況。
細(xì)胞增殖/活性檢測方法比較,常見細(xì)胞增殖/活性檢測方法比較見下表(含李記生物產(chǎn)品、貨號)
活性檢測CCK-8細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒(貨號:AC11L054),開學(xué)大促!*+加贈好禮!
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注意事項:
活動時間:2022.8.22-2022.9.16
活動范圍:全國生物相關(guān)終端客戶
活動編號:Li220822I
所有活動均需關(guān)注李記微信公眾號
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